(قياس التدفق الخلوي، FCM) هو محلل خلايا يقيس شدة التألق لعلامات الخلايا الملطخة. إنها تقنية عالية التقنية تم تطويرها بناءً على تحليل وفرز الخلايا المفردة. يمكنه قياس وتصنيف الحجم والبنية الداخلية والحمض النووي والحمض النووي الريبي (RNA) والبروتينات والمستضدات وغيرها من الخصائص الفيزيائية أو الكيميائية للخلايا بسرعة، ويمكن أن يعتمد على مجموعة هذه التصنيفات.
يتكون مقياس التدفق الخلوي بشكل رئيسي من الأجزاء الخمسة التالية:
1 غرفة التدفق ونظام الموائع
2 مصدر ضوء الليزر ونظام تشكيل الشعاع
3 النظام البصري
4 الإلكترونيات ونظام التخزين والعرض والتحليل
5 نظام فرز الخلايا
من بينها، إثارة الليزر في مصدر ضوء الليزر ونظام تشكيل الشعاع هو القياس الرئيسي لإشارات الفلورسنت في قياس التدفق الخلوي. ترتبط شدة ضوء الإثارة ووقت التعرض بكثافة إشارة الفلورسنت. الليزر هو مصدر ضوء متماسك يمكنه توفير إضاءة ذات طول موجي واحد وكثافة عالية وثبات عالي. إنه مصدر ضوء الإثارة المثالي لتلبية هذه المتطلبات.
هناك نوعان من العدسات الأسطوانية بين مصدر الليزر وغرفة التدفق. تركز هذه العدسات شعاع الليزر بمقطع عرضي دائري منبعث من مصدر الليزر إلى شعاع بيضاوي الشكل بمقطع عرضي أصغر (22 ميكرومتر × 66 ميكرومتر). يتم توزيع طاقة الليزر داخل هذا الشعاع الإهليلجي وفقًا للتوزيع الطبيعي، مما يضمن كثافة الإضاءة المتسقة للخلايا التي تمر عبر منطقة اكتشاف الليزر. من ناحية أخرى، يتكون النظام البصري من مجموعات متعددة من العدسات، والثقوب، والمرشحات، والتي يمكن تقسيمها تقريبًا إلى مجموعتين: أعلى وأسفل غرفة التدفق.
يتكون النظام البصري الموجود أمام غرفة التدفق من عدسة وثقب. تتمثل الوظيفة الرئيسية للعدسة والثقب (عادة عدستين وثقب) في تركيز شعاع الليزر بمقطع عرضي دائري ينبعث من مصدر الليزر في شعاع بيضاوي الشكل بمقطع عرضي أصغر. يؤدي ذلك إلى توزيع طاقة الليزر وفقًا للتوزيع الطبيعي، مما يضمن كثافة إضاءة متسقة للخلايا عبر منطقة اكتشاف الليزر وتقليل التداخل الناتج عن الضوء الشارد.
هناك ثلاثة أنواع رئيسية من المرشحات:
1: مرشح التمرير الطويل (LPF) - يسمح فقط للضوء ذو الأطوال الموجية الأعلى من قيمة محددة بالمرور.
2: مرشح التمرير القصير (SPF) - يسمح فقط بمرور الضوء بأطوال موجية أقل من قيمة محددة.
3: مرشح تمرير النطاق (BPF) - يسمح فقط بمرور الضوء في نطاق طول موجي محدد.
يمكن لمجموعات مختلفة من المرشحات توجيه إشارات الفلورة بأطوال موجية مختلفة إلى أنابيب المضاعف الضوئي الفردية (PMTs). على سبيل المثال، مرشحات الكشف عن الفلورسنت الأخضر (FITC) أمام PMT هي LPF550 وBPF525. المرشحات المستخدمة للكشف عن مضان برتقالي-أحمر (PE) أمام PMT هي LPF600 وBPF575. مرشحات الكشف عن الفلورسنت الأحمر (CY5) أمام PMT هي LPF650 وBPF675.
يستخدم قياس التدفق الخلوي بشكل رئيسي لفرز الخلايا. مع تقدم تكنولوجيا الكمبيوتر، وتطور علم المناعة واختراع تكنولوجيا الأجسام المضادة وحيدة النسيلة، أصبحت تطبيقاتها في علم الأحياء والطب والصيدلة وغيرها من المجالات واسعة الانتشار بشكل متزايد. وتشمل هذه التطبيقات تحليل ديناميكيات الخلية، وموت الخلايا المبرمج، وكتابة الخلايا، وتشخيص الأورام، وتحليل فعالية الدواء، وما إلى ذلك.
وقت النشر: 21 سبتمبر 2023
