(التدفق الخلوي ، FCM) هو محلل الخلايا يقيس كثافة مضان لعلامات الخلايا الملونة. إنها تقنية عالية التقنية تم تطويرها على أساس تحليل الخلايا المفردة وفرزها. يمكن أن يقيس بسرعة وتصنيف الحجم والبنية الداخلية والحمض النووي والحمض النووي الريبي والبروتينات والمستضدات وغيرها من الخواص الفيزيائية أو الكيميائية للخلايا ، ويمكن أن تستند إلى جمع هذه التصنيفات.
يتكون مقياس التدفق الخلوي بشكل أساسي من الأجزاء الخمسة التالية:
1 غرفة التدفق والنظام السوائل
2 مصدر ضوء الليزر ونظام تشكيل الشعاع
3 نظام بصري
4 نظام الإلكترونيات والتخزين والعرض والتحليل
5 نظام فرز الخلايا
من بينها ، الإثارة بالليزر في مصدر ضوء الليزر ونظام تشكيل الشعاع هو القياس الرئيسي لإشارات التألق في التدفق الخلوي. ترتبط شدة ضوء الإثارة ووقت التعرض بشدة إشارة التألق. الليزر هو مصدر إضاءة متماسك يمكن أن يوفر طولًا موجيًا واحدًا ، وعالي الكثافة ، وإضاءة عالية الاستقرار. إنه مصدر ضوء الإثارة المثالي لتلبية هذه المتطلبات.
هناك عدستان أسطوانيان بين مصدر الليزر وغرفة التدفق. تركز هذه العدسات على شعاع ليزر مع مقطع عرضي دائري ينبعث من مصدر الليزر إلى شعاع بيضاوي الشكل مع مقطع عرضي أصغر (22 ميكرون × 66 ميكرون). يتم توزيع طاقة الليزر داخل هذه الحزمة الإهليلجية وفقًا لتوزيع طبيعي ، مما يضمن شدة الإضاءة المتسقة للخلايا التي تمر عبر منطقة اكتشاف الليزر. من ناحية أخرى ، يتكون النظام البصري من مجموعات متعددة من العدسات والثقوب والمرشحات ، والتي يمكن تقسيمها تقريبًا إلى مجموعتين: المنبع والمصابة بغرفة التدفق.
يتكون النظام البصري أمام غرفة التدفق من عدسة وثقب. تتمثل الوظيفة الرئيسية للعدسة والثقب (عادةً في العدسين والثقب) في تركيز شعاع الليزر مع مقطع عرضي دائري ينبعث من مصدر الليزر في شعاع بيضاوي الشكل مع مقطع عرضي أصغر. هذا يوزع طاقة الليزر وفقًا للتوزيع الطبيعي ، مما يضمن شدة الإضاءة المتسقة للخلايا عبر منطقة اكتشاف الليزر وتقليل التداخل من الضوء الضال.
هناك ثلاثة أنواع رئيسية من المرشحات:
1: مرشح تمرير طويل (LPF) - يسمح فقط الضوء بأطوال موجية أعلى من قيمة محددة للمرور.
2: مرشح تمرير قصير (SPF) - يسمح فقط الضوء بأطوال موجية أقل من قيمة محددة لتمريرها.
3: مرشح ممر Bandpass (BPF) - يسمح فقط للضوء في نطاق طول موجي معين للمرور.
يمكن لمجموعات مختلفة من المرشحات توجيه إشارات التألق في أطوال موجية مختلفة للأنابيب الضوئية الفردية (PMTs). على سبيل المثال ، مرشحات للكشف عن مضان الأخضر (FITC) أمام PMT هي LPF550 و BPF525. المرشحات المستخدمة للكشف عن مضان البرتقال الأحمر (PE) أمام PMT هي LPF600 و BPF575. المرشحات للكشف عن مضان أحمر (CY5) أمام PMT هي LPF650 و BPF675.
يستخدم التدفق الخلوي بشكل رئيسي لفرز الخلايا. مع تقدم تكنولوجيا الكمبيوتر ، فإن تطوير علم المناعة واختراع تكنولوجيا الأجسام المضادة أحادية النسيلة ، وتطبيقاتها في علم الأحياء والطب والصيدلة وغيرها من المجالات أصبحت واسعة الانتشار بشكل متزايد. وتشمل هذه التطبيقات تحليل ديناميات الخلايا ، وموت الخلايا المبرمج ، وكتابة الخلايا ، وتشخيص الورم ، وتحليل فعالية المخدرات ، إلخ.
وقت النشر: SEP-21-2023
